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操作規(guī)程

eppendorf Himac CP100NX超速離心機(jī)開頂管管蓋安裝說明

       Himac CP100NX、CP90NX及CP80NX立式超速離心機(jī)P100AT2、P90AT/P80AT/P70AT2、P70AT/P50AT2和P45AT角轉(zhuǎn)頭配套使用開頂管時(shí),按操作指南要求,需為離心管加蓋密封以確保離心樣品安全。與Beckman open-top開口管用的管蓋組件(Cap Assembly)比,Himac品牌開頂管用的管蓋(cap),從結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、工作原理、配套工具的使用方法,都有異曲同工之妙(詳情可參考《Open-top開口超速離心管的選擇及使用方法說明》)。此外,Himac也是按工作容量不同,將常用開頂管分成5.0 - 100mL中容量管和4mL以內(nèi)微量管兩類。而這兩類離心管密封蓋安裝操作流程是不同的。茲根據(jù)eppendorf官方資料分別予以說明。

 

一、5mL及以上標(biāo)準(zhǔn)離心管管蓋的安裝

       Himac品牌中等工作容量開頂管包括了5mL、6.5mL、12mL、40mL、94mL共5種規(guī)格,管徑介于13 - 38mm之間,共同之處是管蓋組件中的閥桿直徑一致,適用的壓帽六角螺母及螺母扳手、位于閥桿正中內(nèi)壁帶螺紋的物料與氣體進(jìn)出通道、控制通道啟閉用的定位螺釘(setscrew)和裝卸定位螺釘用的工具自然是通用的。

       不同容量開頂管配套的管帽直徑大小不一,而管帽安裝時(shí)須使用固定管帽的鉗臺(tái)(Tube Vise)。Himac可提供Tube Vise F、Tube Vise E、Tube Vise C和Tube Vise B四種型號(hào)的鉗臺(tái),分別對(duì)應(yīng)于94mL、40mL、12mL和5mL/6.5mL開頂管蓋。鉗臺(tái)屬轉(zhuǎn)頭可選組件,須與相應(yīng)規(guī)格的管帽配套使用(詳情參考:CP100NX超速離心機(jī)開頂管蓋安裝工具 )。

 

● 物料與工具準(zhǔn)備

       1.1 準(zhǔn)備好離心管、管蓋組件、管蓋螺絲刀B(Tube setter B,作用相當(dāng)于Beckman離心機(jī)提供的Removal Tools)、管蓋擰緊工具(扭力扳手Torque wrench,或套筒扳手Box wrench);

       1.2 轉(zhuǎn)動(dòng)手柄(B)將離心管鉗臺(tái)固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣上,并松開手柄A。

圖1 eppendorf Himac CP100NX超速離心機(jī)5mL以上開頂管管蓋的安裝工具.jpg

● 組裝管蓋

       1.3 將管蓋松散地組裝起來(lái),用管蓋設(shè)定器細(xì)長(zhǎng)的六角扳手(hex wrench)端擰下定位螺釘(setscrew),打開樣品填充和排氣通道;

       1.4 將注射器經(jīng)管蓋組件正中的通道裝填樣品,樣品填充至離心管容量的四分之三;

       1.5 將管蓋閥桿插入管中后下壓管蓋,直到離心管壁頂端與管帽形成良好接觸;

       1.6 手動(dòng)擰緊管蓋六角螺母。

圖2 CP100NX超速離心機(jī)開頂管的管蓋安裝和充填流程.jpg

● 擰緊管蓋

       1.7 將離心管和管蓋插入離心管鉗臺(tái)(tube vice)固定孔中。調(diào)整管的位置,確保管帽的頂部和鉗臺(tái)臺(tái)面平齊;

       1.8 擰緊離心管鉗臺(tái)的手柄A以固定離心管和管蓋。當(dāng)使用的是帶制動(dòng)器(stopper)的管鉗時(shí),注意轉(zhuǎn)動(dòng)管蓋使管蓋閥桿頂部的狹縫,將制動(dòng)器引入閥桿狹縫中。這樣可確保擰緊管蓋螺母時(shí),離心管和閥桿不隨之轉(zhuǎn)動(dòng);

       1.9 根據(jù)制不同管蓋組件指定的擰緊設(shè)計(jì)要求,用扭力扳手、六角扳手或套筒扳手?jǐn)Q緊管蓋上的螺母(使用帶制動(dòng)器的管鉗時(shí),六角扳手轉(zhuǎn)動(dòng)螺母更方便);

不同規(guī)格離心管管帽螺釘工作扭矩參考表

管蓋貨號(hào)

管蓋型號(hào)

適用的離心管

擰緊螺母扭矩值

5720411225

F2-AL Cap

94mL tube: 94PP, 94PC and 94SS Tube

8 N?m

5720411212

E3-AL Cap

40mL tube: 40PP,40PE,40PET Tube

6 N?m

5720411223

E4-AL Cap

40PE tube:   used only for a 40PE tube

6 N?m

5720411211

C-TI Cap

12 mL tube: 12PP,12PC,12PE,12Tia,12SS   Tube

10 N?m

-

B2-TI Cap

6.5 mL tube

10 N?m

5720411202

B-TI Cap

6.5 mL tube 6.5PP Tube,6.5PC Tube

-

備注:1 N?m = 10.2kgf?cm

       1.10 松開管鉗的手柄A,用管蓋螺絲刀的帶螺紋較粗的一頭擰入閥桿中心孔后取下離心管;

圖3 CP100NX超速離心機(jī)開頂管配平和管蓋密封.jpg

● 離心管樣品重量的配平

       1.11 用注射器從管蓋樣品通道進(jìn)一步填充樣品;

       1.12 將對(duì)稱布置的任意兩根離心管的總重量差值控制在0.3g以內(nèi);

       1.13 用管蓋螺絲刀細(xì)端扳手牢固地?cái)Q緊固定螺釘,封閉閥桿通道,以防止樣品和氣體泄漏。

 

二、4mL及以下離心管的管蓋安裝

       Himac的微量開頂管,即工作容量4mL的4PP Tube、3mL的3PP Tube,適用于P90AT、P80AT和P70AT2三款角轉(zhuǎn)頭,配套管蓋為A3-AL Cap。

       5mL及以上的常量離心管管蓋中心設(shè)有樣品通道,因此樣品裝填過程經(jīng)歷的是預(yù)裝3/4體積樣品→安裝管蓋→繼續(xù)填充樣品精確配平→管蓋密封共四個(gè)步驟。

       3-4mL開頂管管徑僅11mm,不具有標(biāo)準(zhǔn)閥桿定位螺釘安裝條件。因此,微量開頂管管蓋無(wú)液體通道,管蓋安裝不再需要裝卸定位螺釘?shù)牟僮?。離心管樣品裝填、管重量配平操作,必須在管蓋安裝前完成。微量管樣品的裝填過程簡(jiǎn)化為裝樣→稱重配平→管蓋安裝三個(gè)步驟。

圖4 CP100NX超速離心機(jī)中等容量與小容量開頂管管蓋結(jié)構(gòu)對(duì)比.jpg

● 物料與工具準(zhǔn)備

       2.1 準(zhǔn)備好離心管、配套管蓋組件、離心管鉗臺(tái)、套筒扳手;

       2.2 轉(zhuǎn)動(dòng)手柄(B)將離心管鉗臺(tái)固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣上,并松開手柄A。

 圖5 Himac CP100NX超速離心機(jī)3-4mL開頂管管蓋裝工具.jpg

● 離心管填充樣品

       2.3 用樣品裝填離心管直至弧形液面中心距離管頂部5mm高度;

 

● 組裝管蓋

       2.4 將管蓋底部朝上,旋轉(zhuǎn)管帽,使閥桿和管帽的標(biāo)記線對(duì)齊后并用手?jǐn)Q緊螺母;

 

● 離心管重量配平

       2.5 將離心管、管蓋同時(shí)放在天平上,調(diào)整液體裝填量,確保對(duì)稱排列的任意兩根離心管及樣品總重量誤差在0.3g以內(nèi),完成配平操作;

 

● 安裝管蓋

       2.6 將管蓋安裝到離心管上,壓下管蓋,直到離心管與管帽接觸;

       2.7 用套筒扳手?jǐn)Q緊管蓋六角螺母;

 

● 擰緊管蓋

       2.8 將離心管和管蓋組合體插入管鉗的孔中并固定;

       2.9 用套筒扳手將管蓋螺母擰緊;

       2.10 徒手從管鉗上取下離心管,完成管蓋安裝。

 

主要參考文獻(xiàn):

Rotors, Tubes, Bottles And Caps Instruction Manual for Ultracentrifuge(S99920420)