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操作規(guī)程

ABI Veriti 梯度PCR儀基本操作規(guī)程

1. 打開PCR儀熱蓋,插入0.2ml的樣品管,蓋好熱蓋。

2. 打開PCR儀電源,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘;初始化完成后,顯示主菜單。

3. 點(diǎn)“Browse/New Methods”,進(jìn)入PCR程序列表。

4.可直接點(diǎn)一個PCR程序,選擇“Start Run”運(yùn)行;點(diǎn)右邊的符號,可選擇不同的文件夾。

5. 若要新建一個PCR程序,點(diǎn)“New”,出現(xiàn)PCR程序:

1)添加一段程序:點(diǎn)中上方的“Stage”位置,該位置變紅;再點(diǎn)“Add”,將加入一段新的程序。2)修改循環(huán)次數(shù)、溫度、時間:點(diǎn)中循環(huán)次數(shù)、溫度或時間位置,下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵,出現(xiàn)合適數(shù)字后,點(diǎn)“Done”確定。

3)添加一個步驟:點(diǎn)“Step”位置,該位置變紅;再點(diǎn)“Add”,軟件將加入一個新的步驟。

4)刪除一個步驟:點(diǎn)“Step”位置,再點(diǎn)“Delete”,軟件將該步驟刪除。

5)建立梯度模式:

a)點(diǎn)中一個步驟,再點(diǎn)“Option”鍵。

b)點(diǎn)“VeriFlex step”,出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:輸入6個梯度溫度,溫度下方的“1-2”是指對應(yīng)的1、2兩行加熱孔,全部輸好后,點(diǎn)“Done”確定(注意:相鄰的兩個梯度溫度之差最大不能超過5℃)。

6)編輯PCR程序完成后,點(diǎn)“Save”保存。

7)點(diǎn)“Run Method”,輸入PCR程序名稱;點(diǎn),選擇保存PCR程序的文件夾(若要保存在USB中,需先插U盤),再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度(這兩項在運(yùn)行程序時可以修改)。點(diǎn)“SaveδExit”確定。

6. 回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序,點(diǎn)“Start Run”出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口:輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度,點(diǎn)“Start Run Now”開始運(yùn)行。

7. 儀器運(yùn)行選中的PCR程序,顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口。

8. 暫停運(yùn)行:點(diǎn)“Pause Run”,儀器暫停,出現(xiàn)暫停選項欄:“Remaining Time”顯示暫停剩余時間,“ Elapse Time”顯示已暫停時間。若要修改暫停時間,點(diǎn),輸入時間值,點(diǎn)“Done”確定;點(diǎn)“Resume    Run”結(jié)束暫停,繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。

9. 終止運(yùn)行:點(diǎn)“Stop”可以終止整個PCR程序。

10. 反應(yīng)報告:PCR程序結(jié)束后,自動生成反應(yīng)報告(可保存和打?。?,顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項指數(shù)。

11. PCR反應(yīng)結(jié)束后,打開熱蓋,取出樣品,關(guān)閉儀器電源。將儀器開蓋放置,待熱蓋和加熱模塊降至室溫后關(guān)上蓋子。