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Applied Biosystems實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

7500 Fast快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

Applied Biosystems 7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀具有5色熒光檢測(cè)通道和96孔快速升降溫模塊。支持常規(guī)單重(Singleplex qPCR)、多重?zé)晒舛糠治觯∕ultiplexing qPCR)和快速PCR檢測(cè)。本欄目提供了其技術(shù)詳情、配置和IQ/OQ服務(wù)套餐方案。

設(shè)備名稱:實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 qPCR儀 real-time PCR system

制 造 商:美國(guó)Thermo Fisher公司      原產(chǎn)地:新加坡

品    牌:Applied Biosystems(AB)

型    號(hào):7500 Fast(96×0.1mL)

技術(shù)詳情:見[技術(shù)規(guī)格]

商品報(bào)價(jià):見[訂貨指南]

主要功能用途

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀具有5色熒光檢測(cè)通道和96孔快速升降溫模塊。支持常規(guī)單重(Singleplex qPCR)、多重?zé)晒舛糠治觯∕ultiplexing qPCR)和快速PCR檢測(cè)。

主要應(yīng)用包括:

1、基因表達(dá)分析

動(dòng)植物和微生物在生理病理、環(huán)境及外來脅迫下相關(guān)基因表達(dá)的變化分析以及SiRNA誘導(dǎo)基因沉默和基因敲除后特定基因表達(dá)水平的檢測(cè)。

2、miRNA表達(dá)水平的檢測(cè)

基于miRNA與特定靶基因mRNA表達(dá)水平變化間的關(guān)聯(lián),研究miRNA 調(diào)控基因表達(dá)機(jī)制。

3、基因分型(SNP genotyping)

利用TaqMan探針、飽和DNA染料HRM曲線分析進(jìn)行基因分型,得出等位基因頻率、基因型占總基因型比率等??蓱?yīng)用于如遺傳病診斷,SNP基因分型,藥物代謝酶DME基因分型,法醫(yī)遺傳學(xué)鑒定等。

4、拷貝數(shù)變異(CNV)

拷貝數(shù)變異(Copy number variation, CNV)是指因基因組發(fā)生重排而導(dǎo)致長(zhǎng)度1KB以上的基因片段的缺失(減少)、插入、重復(fù)(增加)、重排、倒 位、DNA 拷貝數(shù)目變化,也稱為拷貝數(shù)多態(tài)性(copy number polymorphisms, CNPs)。是造成物種個(gè)體差異和人類許多疾?。ㄈ绨┌Y、遺傳性疾病、心血管疾?。┑囊环N重要遺傳基礎(chǔ)。熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)初始樣品的某個(gè)DNA 片段的拷貝數(shù)進(jìn)行定量,用已知拷貝數(shù)為2的DNA內(nèi)參校正而實(shí)現(xiàn)對(duì)目DNA 片段拷貝數(shù)的確認(rèn)。

5、高分辨率溶解曲線分析(High resolution melt, HRM)

DNA序列長(zhǎng)度、GC 含量及堿基互補(bǔ)性差異影響DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的熱穩(wěn)定性。高分辨熔解曲線(high-resolution melt,HRM) 分析是通過實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)升溫過程中與雙鏈DNA特異性結(jié)合的熒光染料釋放的綠色熒光強(qiáng)度的變化,了解PCR 產(chǎn)物中DNA分子的解鏈溫度情況,分析樣品特定基因片段DNA組成變化。實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)運(yùn)行程序中引入溶解曲線分析環(huán)節(jié)后,可借助于專用HRM分析模塊完成HRM分析。HRM用于突變掃描和基因分型,不受突變堿基位點(diǎn)和種類限制,既可對(duì)未知突變進(jìn)行篩查、掃描,又能對(duì)已知突變進(jìn)行分析,還可用于STR分析。

6、病原體檢測(cè)(Pathogen detection)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀能可靠用于臨床醫(yī)學(xué)人體上呼吸道的感染、肺炎、消化道感染、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病,以及畜牧業(yè)、農(nóng)作物病蟲害的病原體的檢測(cè)確認(rèn)、感染嚴(yán)重程度的量化評(píng)估。

7、蛋白熱穩(wěn)定性分析(Protein thermal shift)

利用實(shí)時(shí)定量PCR儀來分析熱穩(wěn)定性,進(jìn)行配體-蛋白結(jié)合的高通量篩選,突變或修飾對(duì)蛋白熱穩(wěn)定性的影響

使用蛋白結(jié)合染料(如Protein Thermal Shift 染料),實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)上運(yùn)行實(shí)時(shí)熔解實(shí)驗(yàn),根據(jù)因蛋白熔解導(dǎo)致熒光圖像差異,分析配體與蛋白的結(jié)合穩(wěn)定性??捎糜谝愿咄亢Y選配體與蛋白的結(jié)合, 篩選能與蛋白靶點(diǎn)結(jié)合的小分子和片段文庫(kù)候選藥物、抗體,鑒定最佳緩沖液條件以改善蛋白的純化和分離等。

8、食品安全和GMO(genetically modified organism)檢測(cè)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)用于食品的微生物污染監(jiān)測(cè)、肉食類食品食材來源和組成的檢驗(yàn)、如轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因的檢測(cè)等。

9、耐藥基因檢測(cè) 

 

性能特點(diǎn)

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀采用的快速加熱塊,可在極速運(yùn)行時(shí)保證熱均一性??焖僮儨匮h(huán)方式,可在短短30分鐘內(nèi)得到高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)結(jié)果;

1、5色熒光檢測(cè)通道完美支持多重實(shí)時(shí)定量分析

7500 Fast系統(tǒng)配置有熒光激發(fā)濾片、檢測(cè)濾片優(yōu)化固定組合的5個(gè)熒光檢測(cè)通道,經(jīng)出廠校準(zhǔn)的染料包括:FAM/SYBR Green I、VIC/JOE、NED/ TAMRA/Cy3、ROX/Texas Red 和 Cy5 染料,能夠在單個(gè)反應(yīng)孔中同時(shí)進(jìn)行多個(gè)靶標(biāo)的同步檢測(cè)。 

2、支持快速反應(yīng)檢測(cè)

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀使用獨(dú)特設(shè)計(jì)的熱循環(huán)模塊,可在極速運(yùn)行時(shí)保證反應(yīng)模塊溫度的均一性。

配合TaqMan Fast Universal PCR Master Mix和Fast SYBGreen Master Mix預(yù)混液和快速光學(xué)反應(yīng)板,在不影響擴(kuò)增延伸階段時(shí)間和實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增效能情況下,快速變溫速率完成規(guī)定實(shí)驗(yàn)程序??焖俟鈱W(xué)反應(yīng)板可確保在 10–30 uL 反應(yīng)體積下獲得與標(biāo)準(zhǔn)常量實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)一致的檢測(cè)精度,而更快速得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

快速熱循環(huán)技術(shù),最短可在30分鐘內(nèi)完成一次運(yùn)行。 

3、高分辨率熔解曲線分析。

Applied Biosystems熔解曲線分析軟件(High Resolution Melting Analysis,HRM)軟件,易于使用,可通過HRM分析實(shí)現(xiàn)更精確的突變篩查和基因分型分析。 

4、21 CFR Part 11合規(guī)管理功能

21 CFR Part 11合規(guī)管理軟件,內(nèi)含安全、審計(jì)、電子簽名套件,實(shí)現(xiàn)運(yùn)行和數(shù)據(jù)的合規(guī),可滿足實(shí)驗(yàn)管理符合美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)第21章第11節(jié) (21 CFR Part 11)的規(guī)定。 

5、AB提供IQ/OQ/IPV驗(yàn)證支持解決方案

經(jīng)驗(yàn)證的AB工程師可幫助執(zhí)行Installation Qualification(IQ)/Operational Qualification(OQ)和Iinstrument Performance Verification(IPV)流程操作。

主要技術(shù)規(guī)格

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要技術(shù)規(guī)格參數(shù)見下表。

技術(shù)要素

規(guī)格參數(shù)

PCR反應(yīng)模塊性能

樣品通量

96孔×0.1 mL

反應(yīng)體積

10~30μL

支持的耗材

0.1mL 96孔反應(yīng)板與光學(xué)蓋膜

0.1 mL96孔反應(yīng)板與光學(xué)平蓋

0.1 mL 8連管與光學(xué)平蓋

0.1 mL單管與光學(xué)平蓋

熱循環(huán)控溫類型

Peltier-Based System

最大模塊變溫速率

5.5℃?sec

最大樣品變溫速率

快速模式± 3.5℃?sec;

標(biāo)準(zhǔn)模式± 1.6℃?sec

溫度準(zhǔn)確度

設(shè)定值/顯示溫度±0.5℃ (35℃至95℃范圍時(shí)鐘啟動(dòng)后3分鐘開始測(cè)量)

溫度均一性

±1℃(35℃至95℃范圍時(shí)鐘啟動(dòng)后30秒測(cè)量)

PCR完成運(yùn)行時(shí)間

<30分鐘運(yùn)行

光學(xué)檢測(cè)模塊性能

激發(fā)光源

OptiFlex Blue LED光源

激發(fā)/檢測(cè)波長(zhǎng)范圍

450–600   nm/500–640 nm

熒光檢測(cè)通道

5個(gè)熒光通道(激發(fā)/發(fā)射濾光片5對(duì))

熒光激發(fā)波長(zhǎng)

CH1:470±15nm

CH2:520±10nm

CH3:550±10nm

CH4:580±10nm

CH5:640±10nm

熒光檢測(cè)波長(zhǎng)

CH1:520±15nm,適用于FAM/SYBR Green(預(yù)校準(zhǔn));SYT09

CH2:558±12nm,適用于VIC(預(yù)校準(zhǔn));HEX, TET, and JOE

CH3:587±10nm,適用于ABY/NED/TAMRA(預(yù)校準(zhǔn));Cy3

CH4:623±14nm,適用于JUN/ROX(預(yù)校準(zhǔn));Texas Red

CH5:682±14nm,適用于Cy5/MUSTANG PURPLE(預(yù)校準(zhǔn));LIZ

多重分析能力

最多5個(gè)靶點(diǎn)

動(dòng)態(tài)范圍

9個(gè)數(shù)量級(jí)的線性動(dòng)態(tài)范圍

靈敏度

可在30μL反應(yīng)中單重TaqMan分析檢測(cè)1拷貝RNaseP模板

精密度

可分辯5000至10000個(gè)RNaseP模板拷貝(2倍),置信度997%

運(yùn)行時(shí)間

快速PCR模式:完成40個(gè)循環(huán)的反應(yīng)<40分鐘

標(biāo)準(zhǔn)PCR模式:完成40個(gè)循環(huán)的反應(yīng)<2小時(shí)

 

安裝運(yùn)行條件

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀在海拔2km以下室內(nèi)使用

工作環(huán)境溫度:15℃ ~ 30℃(推薦)

工作電源:100-240V/50-60Hz/10A;960 W

相對(duì)濕度范圍:20 ~  80%R.H.

主機(jī)重量:34 kg

外觀尺寸尺寸(W×D×H):340×450×490 mm

組成配置

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀工作配置包括7500 Fast主機(jī)、軟件包(含Primer Express Software)、聯(lián)機(jī)電腦工作站、工作線纜、PCR啟動(dòng)工具包及備件。

標(biāo)配附件包括:

1)工作線纜套件(包括聯(lián)機(jī)數(shù)據(jù)線Universal USB Cable、電源電纜power cable, 網(wǎng)線Ethernet cable);

2)PCR Starter Kit(含Splash-free Support Base、MicroAmp Optical 96-Well Fast Thermal Cycling Plate with Barcode、MicroAmp Optical Adhesive Film和Adhesive Film Applicator);

3)儀器運(yùn)行校驗(yàn)工具包(含Chemistry/Calibration Kits、TaqMan RNase P Chemistry Fast Verification Plate、7500 Fast Spectral Calibration Kits和7500 Fast systems TaqMan Fast Reagent Starter Kit);

4)備用件配套工具。 

可選配附件包塊SDS 7500 Fast 21CFR11數(shù)據(jù)審計(jì)軟件模塊和無線網(wǎng)卡。

品名

品牌

貨號(hào)

規(guī)格

中文描述

單價(jià)

USB WiFi Module

Applied Biosystems

A26774

each

High-Power USB Wi-Fi Module,

Maximum speed up to 300 Mbps.

Use with SimpliAmp ProFlex, QuantStudio 1/3/5.

詢價(jià)

21 CFR Part 11 Module

Applied Biosystems

4377355

1 set

21 CFR Part 11 Software Module

 for the 7500 Systems

詢價(jià)

 

基本耗材

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀配置的是96×0.1 mL快速反應(yīng)模塊。適用于快速熒光定量PCR管、PCR聯(lián)排管或PCR板。
為使得反應(yīng)管、反應(yīng)板與反應(yīng)模塊的緊密貼合、熱傳導(dǎo)效率均勻一致,建議采用通過Applied Biosystems儀器兼容性測(cè)試的 MicroAmp系列,以確保獲得精確、可重復(fù)的PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

品名

品牌

貨號(hào)

規(guī)格

描述

報(bào)價(jià)

96孔快速熒光定量PCR板

Applied Biosystems

4346907

10板/盒

MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well

Fast Reaction Plate, 0.1 mL

詢價(jià)

快速定量PCR板彩色組合裝

Applied Biosystems

4483493

5板/盒

MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast

Multicolor Reaction Plates with Barcode

詢價(jià)

快速熒光定量PCR單管

Applied Biosystems

4358297

1000   支/盒

MicroAmp Fast Reaction Tube with Flat Cap,

Clear, 0.1 mL

詢價(jià)

快速PCR 8聯(lián)管

Applied Biosystems

4358293

125條/盒

MicroAmp Fast 8-Tube Strip, 0.1 mL

詢價(jià)

定量PCR封板膜

Applied Biosystems

4360954

25張/盒

MicroAmp Optical   Adhesive Film

詢價(jià)

定量PCR 8聯(lián)平蓋

Applied Biosystems

4323032

300條/盒

MicroAmp Optical 8-Cap Strips,F(xiàn)lat , Clear

詢價(jià)

 

 

訂貨指南

Applied Biosystems 7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀提供實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀提供無電腦工作站、帶臺(tái)式電腦或便攜式電腦工作站三種配置套裝。電腦工作站預(yù)裝有StepOne Software、Primer Express Software應(yīng)用軟件。

序號(hào)

品名

貨號(hào)

套裝配置描述

報(bào)價(jià)

1-1

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

4381530

Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast qPCR Instrument Main Unit

PCR Starter Kit

Universal USB Cable

power cable

Ethernet cable

詢價(jià)

詢價(jià)

1-2

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

工作套餐

4351106

Applied Biosystems 7500 Fast 96-well Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast 96-well qPCR System (4381530)

Dell tower computer

詢價(jià)

詢價(jià)

1-3

7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

工作套餐

4351107

Applied Biosystems 7500 Fast 96-well Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast 96-well qPCR System (4381530)

Dell laptop computer

詢價(jià)

詢價(jià)

 

對(duì)于有GLP、FDA、CFDA管理合規(guī)要求的實(shí)驗(yàn),Applied Biosystems為7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀提供了2Q驗(yàn)證服務(wù)套餐。

序號(hào)

品名

貨號(hào)

套裝配置描述

報(bào)價(jià)

2-1

IPV服務(wù)包7500 FAST

4365571

IPV,SERVICE 7500 FAST

詢價(jià)

2-2

IQ/OQ服務(wù)包7500 FAST

4365572

IQOQ,SERVICE 7500 FAST

詢價(jià)

2-3

IQ/OQ服務(wù)包7500 FAST DX

4415033

IQOQ,SERVICE 7500 FAST DX

詢價(jià)

 

Applied Biosystems為7500 Fast實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀提供質(zhì)保期限延長(zhǎng)服務(wù)套裝(Extended warranty packages)。延保服務(wù)套裝內(nèi)容包括高級(jí)體驗(yàn)培訓(xùn)服務(wù)(SmartStart Orientation)、廠家技術(shù)人員的定期上門現(xiàn)場(chǎng)儀器維護(hù)(AB Assurance Plan with 1 planned maintenance, PM)。

序號(hào)

品名

貨號(hào)

套裝配置描述

報(bào)價(jià)

3-1

7500 Fast 0PM延保套餐

ZG60SC7500FAST

EXT WARRANTY, 7500FAST, 0PM

詢價(jià)

3-2

7500 Fast 1PM延保套餐

ZG61SC7500FAST

EXT WARR, 7500 Fast, 1PM

詢價(jià)